摘要

本文案例分析了Thermo Scientific Varioskan LUX多功能酶标仪（以下简称Varioskan LUX）及其气体控制模块在细胞动力学测量中的应用。通过这项技术，研究者能够在控制CO2和O2浓度的环境中进行长时间细胞培养和动力学分析，从而提高了实验的准确性和效率。

Varioskan LUX多功能酶标仪

Varioskan LUX是一款多功能酶标仪，能够进行吸光度、荧光强度、化学发光、时间分辨荧光和AlphaScreen等五功能检测。其气体控制模块能够同时控制CO2和O2水平，为细胞培养提供一致的生理条件。

技术背景

在药物和学术研究中，基于细胞的检测通常需要精确控制CO2和O2的浓度。Varioskan LUX的集成气体控制模块可以在长时间动力学研究中维持细胞培养的生理条件，确保数据的连续性和准确性。

▲Variskan LUX 多功能酶标仪中的气体浓度

在SkanIt软件中很容易被调整和监控

 ▲Nunc Edge‑96孔板带有填充的边缘，

可作为被动湿度控制

实验方法

细胞在37℃和5% 的CO2条件下根据标准程序培养并传代，使用细胞培养箱（Thermo ScientificTMHeracellTM150）进行培养。每孔含1000个细胞，用90微升培养基接种到两个96孔板中；在加入PrestoBlue试剂（10微升）前，先在培养箱中孵育2小时。

PrestoBlue试剂是一种即用型细胞可渗透的瑞沙脲基溶液，它利用活细胞的还原能力作为细胞活力指示剂，定量测量细胞增殖。当加入到细胞时，PrestoBlue试剂被活细胞的还原环境修饰并高度荧光化。这种颜色变化可以通过荧光来检测。

在测量室中保持温度为37℃，CO2浓度为5%，用Varisikan Lux仪器每小时测一次荧光（激发波长560nm，发射波长590nm，底读），测72小时。 同时进行未控制CO2水平的实验作为对照。

▲有或没有CO2控制的情况下，在Varioskan LUX仪器中进行了HeLa细胞72小时的动力学生长研究。绘制了荧光值减去基线48个重复的平均曲线图。

▲在为期72小时的测量期间，VarisKan LUX仪器中的二氧化碳含量保持稳定。SkanIt软件在每个测量的运行日志中记录气体浓度。

实验结果

实验结果表明，在Varioskan LUX仪器中控制CO2水平对于长时间动力学细胞检测至关重要。使用PrestoBlue试剂，研究者能够监测活细胞在72小时生长期内的增殖情况。结果显示，在CO2控制条件下的HeLa细胞显示出显著的增殖，而在未控制CO2的条件下，荧光信号变化不显著。

结论

Varioskan LUX的集成气体控制模块为细胞动力学测量提供了多项优势，包括节省实验台空间、无数据间隙、通过SkanIt软件轻松调整气体浓度、同时或分别控制CO2和O2、良好的气体浓度稳定性以及运行时气体浓度记录的可追溯性。

应用案例分析

Varioskan LUX多功能酶标仪在细胞动力学测量中的应用，展示了其在生物医学研究中的高效性和实用性。通过精确控制细胞培养环境，研究者能够获得更可靠和准确的实验数据，从而推动科学发现。