超微量分光光度计作为常用的核酸、蛋白等生物大分子的定量和表征工具，广泛应用于生命科学和生物制药等领域，用户仅需微量样品即可获得浓度及吸光度结果。然而在日常使用中，一些用户会对测量结果有疑虑，尤其是当测量结果与预估的结果出现较大差异，或与使用其他方法的定量结果有差异时，用户往往会怀疑设备出现问题或故障。

实际上，作为精密的分析仪器，设备出现问题的几率并不高，尤其是当设备正常使用和日常维护时，更多的问题可能由外部因素导致，如样品的均质、颗粒物或气泡干扰等。本文提所列的方法可帮助您判定设备的状态，以便您放心的进行测量工作。

标准品测量

常用的标准品可使用BSA或核酸标准品，可从各试剂厂家购买，或使用如BCA定量试剂盒，QUBIT核酸定量试剂盒中的标准品。请注意标准品要在效期之内，且保存得当（通常低温）。也可以使用设备厂家提供的小分子化合物标准品，如Implen提供的PHP标准品。标准品是有等级区分的，通常附带有检定证书的标准品，标称浓度会更准确。

    特别指出的是，使用未知浓度的样品，来评估不同设备的测量结果，并以其中一台作为基准，判定另外一台的准确性，是完全错误的。

重复性测量

在缺乏标准品，或标准品由于保存不当状态已存疑时，可使用未知浓度样品做重复性测试。这可以判断设备的稳定性，以排除一些潜在问题，如样品台损坏、样品的非均质，成分干扰等。虽然不能确定准确性误差，但重复性很好的设备，很大几率是没有大问题的。当然，这需要结合您的允差要求，综合考量。

梯度稀释测量

使用已知浓度或未知浓度的样品，均可进行梯度稀释测量，以验证设备的线性稳定性。使用设备的标准曲线功能可便捷地完成此项测试，并给出线性回归。当梯度稀释的R2趋近于1，设备的线性完全可满足广泛的动态范围内的测量要求，同时也可反映设备的良好状态。需要注意的是，梯度稀释时要选择定期校准过的，准确性好的移液器，且正确操作。

基线稳定性测量

光源和CCD检测器，作为设备的核心组件，其稳定性对于设备而言是非常重要的，而基线测量可以很好地反映这些部件的状态。使用水（或空气）作为空白，并且用水（或空气）作为样品，做多次重复测量，如果吸光值的漂移很小，通常可反映设备的光学系统组件状态正常。

光谱曲线

正常的核酸和蛋白质样品，或者其他化合物样品，都具有典型的吸收曲线。异常的曲线往往说明样品的问题，或设备光路系统可能存在的问题。光谱曲线可作为测量结果可靠性的参考，且多数设备可根据曲线给出样品潜在问题的警告。

 通过以上测试方法，可以评估设备的状态和试验数据的可靠性。实际工作中，由于设备本身原因导致的测量不准确毕竟是占少数的。规范操作，正确使用应是用户更应关切的核心。后续，我们将为您解读关于超微量测量样品时的一些常见误区，希望您持续关注，更加惬意地使用您的Nanophotometer®。