Nanophotometer®可以测量的样品种类，是用户关心的问题。特别是经常测量的核酸类样品，我们一般用dsDNA的浓度作为示例，以展示设备的浓度测量范围，而您可能会问，RNA可以测量吗？引物可以测量吗？短序列能测吗？DNA纳米材料能测吗？

超微量分管光度计并不直接测量浓度，而是通过光学检测器测量样品的吸光值，根据朗伯-比尔定律计算浓度的。因此，符合该定律的所有样品均可以被测量。以NP80机型为例，检测器的检测范围为0.02A-330A（已换算为10mm下吸光值），波长范围为200-900nm，那么原则上样品的吸光值和吸收波长只要落在这个范围内，都可以被测量，可获得定量或相对定量的浓度值和其他信息。

核酸中的嘌呤和嘧啶碱基有共轭双键，具有吸收紫外光的性质，其至大吸收波长在250nm-270nm之间。碱基与戊糖、磷酸形成核苷酸后，其至大吸收峰不会改变，至大吸收波长约在260nm，吸收低峰在230nm。目前通行的标准，在波长260nm处，1单位OD值的光密度相当于双链DNA（dsDNA）浓度为50ng/μl、单链DNA（ssDNA）浓度为37ng/μl、RNA浓度为40ng/μl、单链寡核苷酸为33ng/μl（常规值）。

也就是说，设备测量的吸光值，乘以这些系数（1/ε），就可以得到对应样品的浓度值。任何种类的核酸样品都是可以测量的，关键是在软件中正确选择样品种类。Nanophotometer®测量界面可选择多种核酸样品类型，在报告中也会有对应的方法学及消光系数显示。也可以输入核苷酸的序列来确定样品具体的消光系数（可支持70万个以上碱基序列，但通常用于寡核苷酸具体消光系数的确认）。

如果错误地选择了样品类型，但已完成了测量，也有两种方法可以补救：

方法一：不抬起样品盖，重新选择正确的样品类型，再次测量。Implen的样品压缩法支持这种操作，而液柱拉伸法不建议一滴样品的多次测量。

方法二：在结果中查看吸光值数据，手动乘以消光系数，计算浓度。

例如：测量RNA样品时，选择了dsDNA样品，测得浓度为200ng/μl，则样品实际浓度应为160ng/μl（200/50×40ng/μl）（暂不考虑很小的背景校正）。

对于蛋白质应用，原理相同，根据0.02-330A的吸光值检测范围，结合蛋白质的消光系数ε，可确定任意蛋白质样品的浓度检测范围。如BSA（消光系数0.667）检测范围为0.03-478mg/ml，则某消光系数为1.33的单抗样品检测范围即为0.015-239mg/ml。实际的线性范围需要根据样品情况具体测试。 

Nanophotmeter®基于紫外-可见吸收光谱的测量，不但可以胜任各种核酸和蛋白质的定量，还具备全光谱测量的优异性能，Implen在分析化学领域也具有广泛的应用。样品压缩法的一大特点就是良好的样品兼容性，推出的4096阵列CMOS检测器也使测量的可靠性进一步提高。对于多样化的样本测量，Implen可以充分满足用户的期望。

转载：江西立康公众号 链接：https://mp.weixin.qq.com/s/rFeCiftwwKivc3_HSeq9ig