新闻中心
在选购超微量分光光度计时,用户往往更关注浓度范围、检测时间等性能指标,而容易忽略对于性能很重要的的光学硬件参数。一些样本对测量波长是比较敏感的,如具有尖锐吸收峰的样本,进行纯度比值测量的样本,或非吸收峰测量的样本,这对于仪器的光谱分辨性能有较高的要求。毕竟作为精密的分析仪器,光学硬件的配置和性能还是很重要的。


在光谱仪器中,单色器(或分光器)负责分离不同波长的光。但由于光学元件的限制,无法做到绝对的“单色”,各波长的光线总是包含以设定波长为中心的一个小范围。这个范围通常指光谱仪分离出的光强分布曲线最大强度一半处的全宽度,即半高宽,也就是光谱带宽,这是所有类型分光光度计的重要参数。带宽数值越小,意味着单色性越好,光的“颜色”越纯,仪器的分辨能力也越强。当你设定检测样本在500 nm处吸收时,它实际采集的可能是499 nm到501nm这个“窗口”内所有光信号的总和,而带宽就是这个窗口的宽度。


带宽决定仪器的波长分辨率,带宽越小,仪器分辨光谱的能力就越强,容易区分相邻的尖锐峰,也能更准确的测量非吸收峰处的吸收,如半峰吸收。反之,带宽太大,可能会“磨平”光谱的精细结构,产生测量误差。在实际产品中,光谱带宽的设定需要做一定权衡,带宽大,进入检测器的光能量就越多,信号更强、噪声更低。因此也并不是说带宽越小越好,需结合实际使用场景。


对于超微量分光光度计而言,光谱带宽也是一个核心参数。日常测量的核酸与蛋白质,都属于有明显吸收峰的样品。当带宽覆盖了样品吸收峰的变化区域时,就会产生测量偏差。带宽越宽,包含的“非峰值波长”光就越多。这些光被样品吸收得较少,导致检测器收到的光强比理论值高,计算出的吸光度值也就低于真实的峰值吸光度,这种现象叫带宽效应。最终导致测得的浓度偏低。此外,更重要的是,在进行核酸的A260/A280比值测量时,A280是在非吸收峰处测量的,且曲线较陡,更易受到光谱带宽的影响。


值得注意的是,单一的从光谱带宽一个参数评估仪器的光谱性能,是片面的,还需要结合仪器的波长准确性与重复性,杂散光等参数,这些都是从波长维度影响设备性能的因素。微量分光光度计对光谱带宽更为敏感,由于检测光程短,吸光度信号本身就非常小,更经不起带宽效应带来的信号削减。且由于设备的检测浓度范围测量跨度大,一些影响因子也将被放大。成熟稳定的产品由于硬件结构被充分验证和有效的质量控制,光谱带宽和波长准确性能够得到充分保障,测量结果的可靠性好。

Implen的Nanophotometer®全线产品对于设备的光学性能都有高标准的质量控制,特别是在光谱带宽和波长精度上,能够保障客户获得可靠的结果,也正是因为如此,Implen产品在核酸纯度比值的测量上,得到了很多大客户的认可并作为产品放行标准。只做高品质的超微量分光光度计-德国Imlpen。
